Мультипотентные стволовые клетки — производные нервного гребня в лечении индуцированной адреналиновым стрессом глаукомы

Abstract

Актуальность. Применение клеточных технологий в лечении глаукомы является актуальной проблемой в современной офтальмологии. Це ль . И зу чение в лияния ра з личных спо собов вве дения по с тнатальных культивированных мультипотентных стволовых клеток-производных нервного гребня (МСК-ПНГ) на структуру сетчатки. Материалы и методы. Моделирование глаукомы проводилось на крысах Wistar (10-12 мес., самцы) путем внутрибрюшинного введения 0,18% раствора адреналина гидротартрата в дозе, начиная с 10 мкг, доводя до 15 мкг на 100 г массы. Было проведено 20 инъекций за 6 недель. Измерение внутриглазного давления (ВГД) в период индукции проводили аппланационным тонометром Tonolab. МСК-ПНГ получали из волосяного фолликула вибрисс и культивировали по оригинальной методике. МСКПНГ были охарактеризованы при помощи иммуноцитохимии, проточной цитометрии и по способности к направленной дифференциации. Трансплантацию МСК-ПНГ осуществляли: внутривенно – 5 млн. клеток; ретро- и парабульбарно – по 0,5 млн. клеток. Гистоморфометрический анализ сетчатки и зрительного нерва проводили на окрашенных гематоксилин-эозином срезах толщиной 5 мкм. Результаты. МСК-ПНГ имели фенотип nestin+p75+Sox10+cytokeratin-. ВГД у крыс до начала моделирования глаукомы составляло 7-8 мм.рт.ст., после – 20-22 мм.рт.ст. После моделирования глаукомы наблюдали развитие характерных дегенеративнодистрофических изменений: отек зрительного нерва и всех слоев сетчатки; дегенерация аксонов в слое нервных волокон; апоптоз и некроз клеток в слое ганглиозных клеток; разрыхление и увеличение толщины внутреннего сетчатого слоя; истончение и разрывы в наружном сетчатом слое; нарушение цитоархитектоники внутреннего и наружного ядерных слоев; увеличение толщины фоторецепторного слоя. Изменения были стабильны спустя 3 месяца. Трансплантация МСК-ПНГ вызывала позитивные морфологические изменения. Так, внутривенное введение уменьшало отек зрительного нерва и всех слоев сетчатки, но мало способствовало восстановлению цитоархитектоники слоев сетчатки. Парабульбарное введение нативных МСКПНГ приводило к уменьшению отека и восстановлению цитоархитектоники слоев. При ретробульбарном введении МСК-ПНГ уменьшение отека и восстановление цитоархитектоники слоев было наиболее выражено. Заключение. Трансплантация МСК-ПНГ при адреналиновой модели глаукомы имеет позитивный эффект, однако необходимы дальнейшие исследования механизмов влияния трансплантированных МСК-ПНГ на восстановление сетчатки.