Исследование терапевтического потенциала мультипотентных стволовых клетокпроизводных нервного гребня на модели индуцированной адреналиновым стрессом глаукомы

Abstract

Актуальность. Разработка новых эффективных методов лечения глаукомы является одной из актуальных проблем современной офтальмологии. Цель исследования – изучение влияния различных способов введения мультипотентных стволовых клеток - производных нервного гребня (МСК-ПНГ) на структуру сетчатки на адреналиновой модели глаукомы. Материал и методы. Моделирование глаукомы проводилось на крысах Wistar (10-12 мес., самцы) путем внутрибрюшинного введения 0,18% раствора адреналина гидротартрата в дозе, начиная с 10 мкг, доводя до 15 мкг на 100 г массы. Проведено 20 инъекций за 6 недель. Измерение внутриглазного давления (ВГД) в период индукции адреналином проводили аппланационным тонометром Tonolab. МСК-ПНГ получали из волосяного фолликула вибрисcы и культивировали по оригинальной методике. Трансплантацию МСК-ПНГ осуществляли: внутривенно – 5 млн. клеток; ретро- и парабульбарно – по 0,5 млн. клеток. Гистоморфометрический анализ сетчатки проводили на окрашенных гематоксилин-эозином срезах толщиной 5 мкм. Результаты. ВГД у крыс до начала моделирования глаукомы составляло 7-8 мм рт. ст. После моделирования глаукомы ВГД составило 20-22 мм рт. ст. Через месяц после моделирования глаукомы наблюдали развитие характерных дегенеративно-дистрофических изменений: отек сетчатки; дегенерация аксонов в слое нервных волокон; апоптоз и некроз клеток в ганглионарном слое; нарушение цитоархитектоники всех слоев сетчатки; в хориоидее наблюдали стаз и геморрагии. Трансплантация МСК-ПНГ вызывала позитивные морфологические изменения различной выраженности при всех способах доставки. Внутривенное введение уменьшало отек сетчатки, но мало способствовало восстановлению цитоархитектоники слоев. Парабульбарное введение МСК-ПНГ приводило к уменьшению отека и восстановлению цитоархитектоники, наиболее выраженному в ганглионарном и во внутреннем сетчатом слоях. При ретробульбарном введении МСК-ПНГ уменьшение отека и восстановление цитоархитектоники было наиболее выражено. По сравнению с моделью, статистически достоверно увеличивалось количество ядер во внутреннем и наружном ядерных слоях, хотя их количество оставалось ниже, чем у интактных животных. Заключение. Показан позитивный эффект трансплантации МСК-ПНГ при адреналиновой модели глаукомы,который был наиболее выражен при ретробульбарном введении клеток.