Влияние высокочастотного тока на показатели клеточной гибели суспензии живых клеток

Abstract

Введение. При совершенствовании традиционных хирургических методик перспектив- ным направлением является использование высокочастотной биполярной электротермоад- гезии биологических тканей. Цель. Изучить влияние различных режимов высокочастотного тока на показатели клеточной гибели суспензии живых клеток при электротермоадгезии в эксперименте. Материалы и методы. Проведены исследования с применением электротермоадгезии (ЭТА) на линейной перевиваемой культуре Namalwa в 24 луночных планшетах, концентрация 1×106 клеток/мл. В качестве высокочастотного источника тока использовали биполярный электрокоагулятор ЕК-300М1. Результаты и обсуждение. Исследование влияния различных режимов ЭТА и гальванокауте- ра на показатели клеточной гибели показало, что даже непродолжительная экспозиция ЭТА и гальванокаутера приводит к значительным изменениям в показателях гибели клеток. Так, на- блюдался рост количества Annexin V+/PI– клеток в образцах, которые подвергались ЭТА в ре- жимах «сварка», «перекрытие» и «коагуляция», а также после использования гальванокаутера, на основании чего можно сделать вывод о мембранно-ориентированном влиянии указанных манипуляций. Изменения количества Annexin V+/PI+ указывают на отсутствие деструктивно- го влияния режимов ЭТА «сварка», «коагуляция» и гальванокаутера на цитоплазматическую мембрану клеток культуры Namalwa. Важным является тот факт, что ЭТА и гальванокаутер не оказывали влияния на митохондрии клеток, что отражалось в отсутствии изменений ко- личества клеток с пониженным митохондриальным мембранным потенциалом (PI–/R123–). Наиболее деструктивным оказался режим ЭТА «резка», что подтверждается статистически значимо (p<0,05) большими значениями количества Annexin V+/PI+ (поздняя стадия апоптоза) и PI+/R123– (некроз) клеток при снижении концентрации Annexin V+/PI–. Выводы. Проведенные исследования выявили зависимость количества клеток, имеющих признаки гибели по различным типам, от режима ЭТА. Было показано, что наибольшее де- структивное влияние суспензия клеток претерпела под воздействием высокочастотного тока (66 кГц) в режиме «резка», а наименьшее – в режиме «сварка». Полученные результаты указывают на то, что ЭТА влияет не только на молекулы коллагена или эластина, но и на структурные элементы цитоплазматической мембраны клеток. Интересен тот факт, что проведенные исследования не выявили влияния ЭТА на внутриклеточные струк- туры.